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细胞杂交又称细胞融合(cellfusion),是将来源不同的两种细胞融合成一个新细胞。大多数体细胞杂交是用人的细胞与小鼠、大鼠或仓鼠的体细胞(hybridcell)进行杂交。细胞融合后,要进行异核体的筛选。
体细胞杂交又称体细胞融合,指将两个遗传物质不同的体细胞融合成一个体细胞的过程。融合形成的杂种细胞,兼有两个细胞的染色体。
定义:体细胞杂交(Somatic cell hybridization)是指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。历史:1972年,美国科学家卡尔森(Sarlson)开发出第一个体细胞杂种植物(烟草)。
杂交时间:植物细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成的新植物体结束。原生质体制备:用酶解法去除细胞壁(纤维素酶和果胶酶)。原生质体融合:膜融合(高钙、高pH诱导融合)、核融合(杂种细胞第一次有丝分裂时融合)。
植物体细胞杂交的过程包括将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B;运用物理或化学方法诱导融合,形成杂种细胞后再利用植物细胞培养技术将其培养成杂种植物体。
植物体细胞杂交的过程包括原生质体的制备,原生质体融合的诱导,杂种细胞的筛选和培养,以及杂种植株的再生与鉴定等环节。下面以烟草和大豆的体细胞杂交为例,简要介绍植物体细胞杂交的过程。
1、操作过程包括:原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。原生质体制备是用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁分解掉,只留下细胞膜(质膜)包裹着细胞内含物。
2、植物体细胞杂交的过程包括将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B;运用物理或化学方法诱导融合,形成杂种细胞后再利用植物细胞培养技术将其培养成杂种植物体。
3、植物体细胞杂交的过程包括原生质体的制备,原生质体融合的诱导,杂种细胞的筛选和培养,以及杂种植株的再生与鉴定等环节。下面以烟草和大豆的体细胞杂交为例,简要介绍植物体细胞杂交的过程。
1、植物体细胞杂交得到的后代,没有经过减数分裂,属于无性生殖。植物体细胞杂交得到的杂种植株,在理论上来讲是可育的,减数分裂过程中,能够发生正常的联会和配对,能够产生正常的生殖细胞,就能够通过有性生殖产生后代。
2、由于染色体会随机丢失,一般是不可育的,需要秋水仙素处理恢复可育性。
3、如果细胞内有同源染色体,可以正常减数分裂产生配子,就可育。
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